(Cytometry ҷараён, FCM) як анализатори ҳуҷайра мебошад, ки шиддатнокии флуорессенсияи аломатҳои ҳуҷайраҳои доғдорро чен мекунад. Ин як технологияи баландтехнологӣ аст, ки дар асоси таҳлил ва ҷудо кардани ҳуҷайраҳои ягона таҳия шудааст. Он метавонад андоза, сохтори дохилӣ, ДНК, РНК, сафедаҳо, антигенҳо ва дигар хосиятҳои физикӣ ё химиявии ҳуҷайраҳоро зуд андоза ва гурӯҳбандӣ кунад ва метавонад ба ҷамъоварии ин таснифҳо асос ёбад.
Цитометри ҷараён асосан аз панҷ қисмати зерин иборат аст:
1 Камераи ҷараён ва системаи моеъ
2 Манбаи нури лазерӣ ва системаи ташаккули чӯбро
3 Системаи оптикӣ
4 Системаи электроника, нигоҳдорӣ, намоиш ва таҳлил
5 Системаи ҷудокунии ҳуҷайраҳо
Дар байни онҳо барангезиши лазерӣ дар манбаи нури лазерӣ ва системаи ташаккули чӯб ченкунии асосии сигналҳои флуоресцентӣ дар цитометрияи ҷараён мебошад. Шиддати нури барангезанда ва вақти экспозиция ба шиддатнокии сигнали флуоресцентӣ алоқаманд аст. Лазер як манбаи нури ҳамоҳангшудаест, ки метавонад равшании якмавҷ, шиддатнокии баланд ва устувории баландро таъмин кунад. Он манбаи беҳтарини нури ҳаяҷонбахш барои қонеъ кардани ин талабот аст.
Дар байни манбаи лазер ва камераи ҷараён ду линзаи силиндрӣ мавҷуд аст. Ин линзаҳо нури лазериро бо буриши даврашакл аз манбаи лазер ба нури эллиптикии буриши хурдтар (22 мкм × 66 мкм) равона мекунанд. Энергияи лазерӣ дар дохили ин нури эллиптикӣ мувофиқи тақсимоти муқаррарӣ тақсим карда мешавад, ки шиддатнокии равшани пайвастаро барои ҳуҷайраҳое, ки аз минтақаи ташхиси лазерӣ мегузаранд, таъмин мекунад. Аз тарафи дигар, системаи оптикӣ аз маҷмӯи сершумори линзаҳо, сӯрохиҳо ва филтрҳо иборат аст, ки онҳоро тақрибан ба ду гурӯҳ тақсим кардан мумкин аст: болооб ва поёноби камераи ҷараён.
Системаи оптикӣ дар назди камераи ҷараён аз линза ва сӯрох иборат аст. Вазифаи асосии линза ва сӯрох (одатан ду линза ва сӯрохи) ин равона кардани нури лазерӣ бо буриши даврашакл, ки аз манбаи лазер мебарояд, ба нури эллиптикӣ бо буриши хурдтар аст. Ин энергияи лазерро мувофиқи тақсимоти муқаррарӣ тақсим карда, шиддатнокии мунтазами равшании ҳуҷайраҳоро дар тамоми минтақаи муайянкунии лазер таъмин мекунад ва дахолати нури гумроҳшударо кам мекунад.
Се намуди асосии филтрҳо мавҷуданд:
1: Филтри гузариш дароз (LPF) - танҳо имкон медиҳад, ки нур бо дарозии мавҷҳо аз арзиши мушаххас баландтар гузарад.
2: Филтри кӯтоҳгузар (SPF) - танҳо имкон медиҳад, ки рӯшноӣ бо дарозии мавҷҳо аз арзиши мушаххас гузарад.
3: Филтри гузариш (BPF) - танҳо имкон медиҳад, ки рӯшноӣ дар диапазони муайяни дарозии мавҷ гузарад.
Комбинатсияҳои гуногуни филтрҳо метавонанд сигналҳои флуоресцентиро дар дарозии мавҷҳои гуногун ба қубурҳои инфиродии фотомултипликатор (PMTs) равона кунанд. Масалан, филтрҳо барои муайян кардани флуорессенсияи сабз (FITC) дар назди PMT LPF550 ва BPF525 мебошанд. Филтрҳое, ки барои муайян кардани флуорессенсияи норанҷӣ-сурх (PE) дар назди PMT истифода мешаванд, LPF600 ва BPF575 мебошанд. Филтрҳо барои муайян кардани флуорессенсияи сурх (CY5) дар назди PMT LPF650 ва BPF675 мебошанд.
Цитометрияи ҷараён асосан барои ҷудокунии ҳуҷайраҳо истифода мешавад. Бо пешрафти технологияи компютерӣ, рушди иммунология ва ихтирои технологияи антителоҳои моноклоналӣ, татбиқи он дар биология, тиб, дорусозӣ ва дигар соҳаҳо торафт васеътар мегардад. Ба ин барномаҳо таҳлили динамикаи ҳуҷайра, апоптози ҳуҷайра, чопкунии ҳуҷайраҳо, ташхиси варамҳо, таҳлили самаранокии маводи мухаддир ва ғайра дохил мешаванд.
Вақти фиристодан: сентябр-21-2023
